尊龙凯时 生物医学研究领域创新推出的小鼠谷氨酰胺合成酶（GS）试剂盒，旨在为广大科研工作者提供高效、可靠的实验工具。本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），可用于定量检测血清、血浆、组织匀浆以及相关液体样本中的小鼠谷氨酰胺合成酶（GS）含量。

实验原理

试剂盒采用双抗体夹心法，其步骤为：首先在预先包被的小鼠谷氨酰胺合成酶捕获抗体微孔中依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经过温育和彻底洗涤后，使用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化下，TMB由无色转变为蓝色，随后在酸性条件下形成终色。显色深浅与样品中小鼠谷氨酰胺合成酶（GS）含量呈正相关，通过酶标仪在450nm下测定吸光度（OD值），从而计算样品浓度。

样本处理及要求

1. 血清：收集于血清分离管的全血标本需在室温放置2小时或于4℃下过夜，1000×g离心20分钟后取上清，或将上清保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

2. 血浆：使用EDTA或肝素作为抗凝剂进行标本采集，需在采集后30分钟内于2-8℃下1000×g离心15分钟后取上清进行检测。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS冲洗组织并去除残留血液，将组织切碎后与相应体积的PBS混合，推荐加入蛋白酶抑制剂。研磨后可进一步进行超声破碎处理，最终离心提取上清进行检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本：需以1000×g离心20分钟取上清进行检测，也可保存于低温环境。

实验步骤

1. 从室温平衡20分钟后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条建议密封放回冷藏区。

2. 设置标准品孔和样本孔，各加50μL不同浓度的标准品。

3. 向样本孔中加入待测样本50μL，空白孔不加样本。

4. 在所有孔中（除空白孔外）加入100μL HRP标记的检测抗体，使用封板膜封住，37℃水浴或恒温箱温育60分钟。

5. 吸走液体后每孔加350μL洗涤液，静置1分钟后甩去洗涤液，重复此过程五次。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。

7. 添加50μL终止液，在15分钟内测量各孔OD值。

试剂盒性能及注意事项

本试剂盒的检测范围为25pg/mL–800pg/mL，灵敏度低于10pg/mL，具有良好的特异性和重复性，确保检测结果的可靠性。使用时请严格遵循操作步骤，确保所有试剂达到室温并避免交叉污染。

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