### 小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒背景简介
肠道屏障在维持肠道稳态方面发挥着重要的作用,主要通过防止细菌的过度吸收来实现这一功能。免疫球蛋白,例如分泌型IgA、IgG和IgM,参与了这一保护机制。为了帮助研究人员进行相关实验,尊龙凯时旗下的Chondrex公司推出了小鼠肠道灌洗液的标准制备方案,并提供了可同时检测总免疫球蛋白和抗原特异性抗体的ELISA试剂盒。
抗原抗体水平能够反映肠道免疫功能的状态。例如,在口服卵清蛋白(OVA)并联合霍乱毒素佐剂进行免疫时,可以有效增强肠道内抗OVA的IgA抗体。这种免疫反应可以通过比较抗OVA IgA抗体与总IgA水平来进行评估。
### 产品应用
- 肠道免疫功能状态评估
- 过敏原特异性抗体检测
- 肠道相关特异性抗体检测
### 小鼠肠道灌洗液制备流程(抗体分析用)
基于Lycke等人发表的文献方法,改进的小鼠肠道灌洗液的制备流程如下:
- 取出小鼠小肠组织,用剪刀夹钳夹住肠道一端。
- 使用聚四氟乙烯(PTFE)导管注射器,缓慢向肠腔注入3ml的蛋白酶抑制剂溶液(包含0.1mg/ml胰蛋白酶抑制剂、50mM EDTA和1mM PMSF的PBS缓冲液),以避免刺穿肠道。
- 夹闭肠道另一端,室温孵育10分钟。
- 收集肠道内容物至试管,并进行剧烈涡旋震荡和超声破碎处理。
- 在54°C条件下,以1800rpm离心10分钟。
- 取上清液转移至新管,按照1ml灌洗液添加10μl 5%氯化钠的比例混合。
- 室温孵育15分钟。
- 按照1ml灌洗液添加50μl正常山羊血清的比例混合。此混合液可按1:1比例用ELISA试剂盒配套的样品稀释缓冲液稀释后进行ELISA检测。
### 产品订购
检测指标包括:
- IgA、IgE、IgM、IgG及其亚型IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c和IgG3
- 大肠杆菌、脂多糖、肠毒素A、肠毒素B、卵清蛋白及多种过敏原
如需针对特定抗原、细菌或毒素的抗体评估方案,请咨询尊龙凯时中国区总代理——北京博蕾德生物科技有限公司。