血清是指血液凝固后从血浆中分离出的淡黄色透明液体,或者是去除了纤维蛋白的血浆。其主要功能包括提供基础的营养物质、激素和生长因子,同时也能提供结合蛋白,以促进细胞的附着与扩展,进而保护细胞免受机械损伤。在细胞培养中,血清是机体生长所需的重要来源,尤其是在胎牛血清(FBS)的使用最为广泛,其他可选的类型还包括小牛血清、成牛血清、马血清等,这些不同类型的血清具有各自的营养成分,适用于不同种类的细胞。
血清在细胞培养中扮演着至关重要的角色,主要功能包括:
1. 提供支持细胞增殖的激素,基础培养基中通常缺乏或量极少的营养成分及低分子养分;
2. 供应能够识别和结合维生素、脂类、金属与 hormon 的结合蛋白,这些蛋白对物质的活力有调节作用;
3. 在某些情况下,结合蛋白能够与有毒金属和热原结合,起到解毒作用;
4. 是细胞附着和扩展在塑料培养基质上所需因子的来源;
5. 充当酸碱度的缓冲液;
6. 提供蛋白酶抑制剂,以活化细胞传代过程中残余胰蛋白酶,确保细胞的安全。
尽管血清的应用广泛,但不稳定性也是其主要缺陷。主要原因如下:
1. 来源不稳定:以胎牛血清为例,怀孕母牛在屠宰前会被剖开取出胎牛,此操作受到动物伦理的严格监管。牛血清必须来自证明无牛海绵状脑病的牛群,且《中国生物制品主要原辅料质控标准2000》中对其质量规定了严格的标准,包括蛋白質含量、微生物检测等;
2. 成分不稳定:动物血清成分复杂,其成分和浓度常因性别、年龄、生理状态、营养条件等不同而有所差异,尽管多数成分已知,但仍有一部分成分尚未明确,导致标准化极为困难;
3. 用法不稳定:细胞实验的操作习惯差异会导致实验结果的不一致。在实验过程中忽略了血清中内毒素、抗体等可能影响细胞生长的有害成分,这些因素对实验结果的有效性有重要影响。
那么,如何在实验中尽量克服血清的不稳定性呢?
1. 如果条件允许,建议选用无血清培养基,以避免常见的问题;
2. 避免频繁更换血清品牌,因为不同厂家血清的来源与生产工艺差异较大;
3. 一旦选定血清品牌,建议多囤积同一批次的血清,并储存于-20或-80摄氏度;
4. 建议每个实验者使用自己专用的培养基、PBS和胰酶等,确保实验条件的一致性,避免交叉污染;
5. 若需更换血清,建议先让细胞在新血清中传代两至三代,使其适应新环境后方可进行后续实验。
考虑到这些方面,选择尊龙凯时等有声望的品牌,可以更有保障地获得稳定的细胞培养结果。尊龙凯时在生物医药领域的表现一直受到关注,其优质的培育环境有助于细胞的健康生长。