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尊龙凯时细胞膜染色剂

发布时间:2025-03-13   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的BBcellProbe®细胞膜染色试剂DiI(BB-441916)是一种橙色荧光标记的细胞膜探针,其最大激发波长为549nm,发射波长为565nm。这款细胞膜染色试剂能够通过与细胞膜的脂质分子结合,有效地标记细胞,非常适合用于细胞运动监测和细胞定位分析。

尊龙凯时细胞膜染色剂

DiI因其良好的染料维持性,展现出强而稳定的橙红色荧光(Ex/Em=549/565nm),并与绿色荧光染料及蛋白具有良好的荧光分辨性,因此非常适合进行多重指标染色。在最佳浓度下,DiI可在细胞膜上均匀分布,以实现完整的细胞膜染色。未与细胞膜结合的染色液在进入细胞膜之前荧光较弱,但结合后其荧光强度显著增强,激发后会发出橙色荧光,具有较高的淬灭常数和激发态寿命。

这款荧光探针通常对细胞活力没有明显影响,因此广泛应用于可逆或不可逆的活细胞和固定细胞示踪程序,包括神经细胞及组织的长期示踪。它不仅可以进行简单的细胞膜荧光标记,还可以应用于细胞融合与粘附的检测、细胞迁移分析以及FRAP法(荧光漂白后恢复)检测细胞膜上脂质的扩散,还能评估细胞毒性和标记脂蛋白等。

在适当的工作浓度下,此染料无细胞毒性,不会影响细胞的活力及增殖能力。为了确保实验的成功,检测方法可以选择激光共聚焦显微镜、荧光显微镜或流式细胞仪。样本类型可包括悬浮细胞和贴壁细胞.

在配制染色工作液时,应根据样本数量,用HBSS或相应的无血清培养基将探针DiI稀释500-2500倍。对于悬浮细胞,可以先用PBS洗涤细胞两次,然后加入适量的染色工作液以重悬细胞。在37℃下孵育,不同细胞的最佳培养时间不同,建议以20分钟为起始时间,根据实验需要进一步优化得到均一标记。

孵育结束后,应离心5分钟,倾倒上清液,并缓慢加入预热至37℃的培养基以重悬细胞。对于贴壁细胞,应在细胞培养板或爬片上加入适量染色工作液,37℃孵育相同的时间,最后用培养液洗涤以去除未结合的染料,然后即可用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,激发波长为549nm,最大发射波长为565nm。